Villanelle é retratada como abertamente bissexual, envolvendo-se em encontros sexuais com homens e mulheres, enquanto Eve — inicialmente casada com um homem — questiona suas atrações e confessa sentimentos intensos por Villanelle no final. Essa tensão queer impulsiona momentos emocionais chave ao longo dos episódios, incluindo vigilância, encontros próximos e o confronto final da temporada onde Eve apunhala Villanelle em meio a uma intimidade carregada.

A criadora Phoebe Waller-Bridge enfatizou personagens femininas complexas e transgressoras e a natureza sexual da obsessão, alinhando-se com temas feministas de mulheres navegando e subvertendo o trabalho de inteligência dominado por homens. A escalação coloca uma atriz asiática no papel principal de Eve (adaptado de romances originais onde sua etnia não é destacada), ao lado de diversidade de apoio como Kirby Howell-Baptiste como a colega Elena, embora esses elementos permaneçam secundários ao enredo de suspense. A temporada integra representação progressiva de agência feminina e desejo não-heteronormativo como central para o apelo dos personagens, sem palestras explícitas ou enquadramento de política de identidade como premissa.