O elenco principal conta com Anna Torv como Olivia Dunham, uma agente capaz do FBI cujas habilidades derivam diretamente de experimentos dentro do universo, em vez de qualquer enquadramento baseado em identidade; Joshua Jackson como Peter Bishop; John Noble como Walter Bishop; e atores de apoio, incluindo Jasika Nicole como Astrid Farnsworth em um papel orgânico de assistente. Os enredos dos episódios, como a introdução de Lincoln Lee em "Neither Here Nor There", as anomalias de loop temporal em "And Those We've Left Behind", ou as revelações de Cortexiphan em "A Better Human Being", focam exclusivamente em mistérios científicos, traumas pessoais de Walter e conflitos interuniversitários, sem nenhuma mensagem de justiça social, narrativas de opressão sistêmica ou críticas às normas tradicionais.