A história de oito missões centra-se em recuperar pinturas espalhadas para decodificar um mapa, sequências de plataforma, furtividade e combate, sem criação de personagens, sistemas de romance ou relacionamentos dirigidos pelo jogador. Salaì, o aprendiz histórico de Leonardo, aparece como um personagem coadjuvante que auxilia Ezio; o jogo inclui diálogos sutis que implicam um relacionamento romântico entre Leonardo e Salaì, com Ezio declarando aprovação, baseando-se em especulações históricas de longa data sobre da Vinci.

Este elemento é sabor de fundo incidental em um cenário renascentista e não influencia a premissa central, a progressão do enredo ou os temas de aventura e conspiração. Não há evidências de mandatos de DEI dos desenvolvedores, envolvimento de consultoria, personagens com gênero trocado, mecânicas de pronomes ou comentários sociais explícitos. A recepção no Metacritic foi geralmente favorável (75-76 agregado) com elogios pela caracterização e volume de conteúdo, mas sem reações negativas do público ou lacunas entre críticos e público ligadas à ideologia.