Las tramas centrales giran en torno a personajes queer, incluyendo a Angel Dumott Schunard (una drag queen interpretada por la drag queen no binaria Valentina), Tom Collins (gay, interpretado por Brandon Victor Dixon), Maureen Johnson (bisexual, Vanessa Hudgens) y Joanne Jefferson (lesbiana, Kiersey Clemons), con escenas explícitas de romance entre personas del mismo sexo, discusiones en grupos de apoyo sobre el estigma del VIH y canciones como 'La Vie Bohème' que celebran identidades y estilos de vida no tradicionales frente a las normas capitalistas. La intención de Larson, extraída de pérdidas personales por el SIDA y las experiencias de sus amigos, puso deliberadamente estos elementos en primer plano para desafiar las actitudes sociales de los años 90, haciendo que la política de identidad y las críticas a las estructuras tradicionales sean inseparables de la narrativa.